通化東寶藥業(yè)股份有限公司郭常閏獲國家專利權(quán)
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龍圖騰網(wǎng)獲悉通化東寶藥業(yè)股份有限公司申請的專利德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法及檢測試劑盒獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號為:CN114720703B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-05-13發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為:202210366450.7,技術(shù)領(lǐng)域涉及:G01N33/74;該發(fā)明授權(quán)德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法及檢測試劑盒是由郭常閏;陳瑩瑩;彭媛媛;于秀梅設(shè)計研發(fā)完成,并于2022-04-08向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。
本德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法及檢測試劑盒在說明書摘要公布了:本發(fā)明涉及生物檢測領(lǐng)域,特別涉及德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法及檢測試劑盒。本發(fā)明通過含有胰島素受體的細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)來檢定德谷胰島素生物活性,細(xì)胞培養(yǎng)后,加入制備好的不同濃度的待測樣品及標(biāo)準(zhǔn)品與細(xì)胞相互作用,加入含抑制劑裂解液對細(xì)胞進(jìn)行裂解,裂解后將細(xì)胞裂解液轉(zhuǎn)移到已用抗體包被好的包被檢測板中,結(jié)合,加入PY?20報告抗體,再加入顯色液顯色,最后終止液終止反應(yīng),多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行讀數(shù)。本發(fā)明提供的方法通過ELISA試劑盒來進(jìn)行實驗,與現(xiàn)有技術(shù)的體外細(xì)胞及小鼠血糖試驗相比,不容易受到外源因素的影響,縮短了檢測時間,提高了實驗結(jié)果的準(zhǔn)確度。
本發(fā)明授權(quán)德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法及檢測試劑盒在權(quán)利要求書中公布了:1.德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法,其特征在于,包括如下步驟:步驟A:取含有胰島素受體的細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、鋪板、過夜培養(yǎng);步驟B:取捕獲抗體經(jīng)包被緩沖液稀釋后鋪板,封板后避光孵育過夜;步驟C:取標(biāo)準(zhǔn)品和供試品經(jīng)系列梯度稀釋,分別轉(zhuǎn)至清洗后的步驟A獲得的細(xì)胞板,封板后孵育,再經(jīng)裂解液裂解,獲得細(xì)胞裂解液;步驟D:取步驟B獲得的檢測板清洗后經(jīng)封閉液封閉后培養(yǎng)、去除封閉液、清洗,轉(zhuǎn)入步驟C獲得的所述細(xì)胞裂解液,培養(yǎng);步驟E:清洗后,加入報告抗體孵育;去除所述報告抗體,清洗,經(jīng)顯色液顯色,避光孵育,再加入終止液,檢測,獲得EC50值;根據(jù)所述標(biāo)準(zhǔn)品EC50值、所述供試品EC50值、標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)示比活、所述標(biāo)準(zhǔn)品的起始濃度和所述供試品的起始濃度,獲得所述德谷胰島素生物學(xué)活性;步驟A中所述鋪板的細(xì)胞密度為7.5×104個ml;步驟C中所述系列梯度稀釋為倍比稀釋,所述倍比稀釋的倍數(shù)為2倍;所述標(biāo)準(zhǔn)品或所述供試品的初始濃度為3000pmolml步驟C中所述孵育具體為:于37℃,5%CO2孵育30min±10min;步驟E獲得所述德谷胰島素生物學(xué)活性具體為:德谷胰島素生物活性(nmolmg)=標(biāo)準(zhǔn)品EC50供試品EC50×標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)示比活×校正因子;其中,所述標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)示比活為163.9nmolmg,校正因子=標(biāo)準(zhǔn)品起始濃度供試品起始濃度。
如需購買、轉(zhuǎn)讓、實施、許可或投資類似專利技術(shù),可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)@麢?quán)人通化東寶藥業(yè)股份有限公司,其通訊地址為:134123 吉林省通化市通化縣二密鎮(zhèn)東寶新村;或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服,聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。
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