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龍圖騰網(wǎng)獲悉通化東寶藥業(yè)股份有限公司申請的專利德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法及檢測試劑盒獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號為：CN114720703B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-05-13發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為：202210366450.7，技術(shù)領(lǐng)域涉及：G01N33/74；該發(fā)明授權(quán)德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法及檢測試劑盒是由郭常閏;陳瑩瑩;彭媛媛;于秀梅設(shè)計研發(fā)完成，并于2022-04-08向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。

本德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法及檢測試劑盒在說明書摘要公布了：本發(fā)明涉及生物檢測領(lǐng)域，特別涉及德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法及檢測試劑盒。本發(fā)明通過含有胰島素受體的細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)來檢定德谷胰島素生物活性，細(xì)胞培養(yǎng)后，加入制備好的不同濃度的待測樣品及標(biāo)準(zhǔn)品與細(xì)胞相互作用，加入含抑制劑裂解液對細(xì)胞進(jìn)行裂解，裂解后將細(xì)胞裂解液轉(zhuǎn)移到已用抗體包被好的包被檢測板中，結(jié)合，加入PY?20報告抗體，再加入顯色液顯色，最后終止液終止反應(yīng)，多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行讀數(shù)。本發(fā)明提供的方法通過ELISA試劑盒來進(jìn)行實驗，與現(xiàn)有技術(shù)的體外細(xì)胞及小鼠血糖試驗相比，不容易受到外源因素的影響，縮短了檢測時間，提高了實驗結(jié)果的準(zhǔn)確度。

本發(fā)明授權(quán)德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法及檢測試劑盒在權(quán)利要求書中公布了：1.德谷胰島素生物學(xué)活性的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：步驟A：取含有胰島素受體的細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、鋪板、過夜培養(yǎng)；步驟B：取捕獲抗體經(jīng)包被緩沖液稀釋后鋪板，封板后避光孵育過夜；步驟C：取標(biāo)準(zhǔn)品和供試品經(jīng)系列梯度稀釋，分別轉(zhuǎn)至清洗后的步驟A獲得的細(xì)胞板，封板后孵育，再經(jīng)裂解液裂解，獲得細(xì)胞裂解液；步驟D：取步驟B獲得的檢測板清洗后經(jīng)封閉液封閉后培養(yǎng)、去除封閉液、清洗，轉(zhuǎn)入步驟C獲得的所述細(xì)胞裂解液，培養(yǎng)；步驟E：清洗后，加入報告抗體孵育；去除所述報告抗體，清洗，經(jīng)顯色液顯色，避光孵育，再加入終止液，檢測，獲得EC50值；根據(jù)所述標(biāo)準(zhǔn)品EC50值、所述供試品EC50值、標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)示比活、所述標(biāo)準(zhǔn)品的起始濃度和所述供試品的起始濃度，獲得所述德谷胰島素生物學(xué)活性；步驟A中所述鋪板的細(xì)胞密度為7.5×104個ml；步驟C中所述系列梯度稀釋為倍比稀釋，所述倍比稀釋的倍數(shù)為2倍；所述標(biāo)準(zhǔn)品或所述供試品的初始濃度為3000pmolml步驟C中所述孵育具體為：于37℃，5%CO2孵育30min±10min；步驟E獲得所述德谷胰島素生物學(xué)活性具體為：德谷胰島素生物活性（nmolmg）=標(biāo)準(zhǔn)品EC50供試品EC50×標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)示比活×校正因子；其中，所述標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)示比活為163.9nmolmg，校正因子=標(biāo)準(zhǔn)品起始濃度供試品起始濃度。

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