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龍圖騰網(wǎng)獲悉北京華牛世紀(jì)生物技術(shù)研究院申請(qǐng)的專利一種以基因芯片轉(zhuǎn)制印板再大量印制基因芯片的方法獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN114471394B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-07-04發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為：202011270744.7，技術(shù)領(lǐng)域涉及：B01J19/00；該發(fā)明授權(quán)一種以基因芯片轉(zhuǎn)制印板再大量印制基因芯片的方法是由華子昂;劉寶全;朱美瑛;王明齊;萬(wàn)君興;竹添;孫寧;張建;李娜設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2020-11-13向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。

本一種以基因芯片轉(zhuǎn)制印板再大量印制基因芯片的方法在說明書摘要公布了：本發(fā)明屬于生物芯片領(lǐng)域，尤其是涉及一種以基因芯片轉(zhuǎn)制印板再大量印制基因芯片的方法，具體為：以成品的初始基因芯片為母板，利用DNA聚合酶將母板上的探針序列按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則轉(zhuǎn)變?yōu)橛“迳系膶?duì)應(yīng)位置上的模板序列，母板的探針序列與印板的模板序列一一對(duì)應(yīng)，再將印板的模板序列利用DNA聚合酶轉(zhuǎn)成新基因芯片上的探針序列，新基因芯片上的探針序列與印板的模板序列一一對(duì)應(yīng)，通過兩次DNA聚合酶催化的高保真DNA復(fù)制過程將初始基因芯片上的探針序列轉(zhuǎn)變?yōu)樾禄蛐酒系奶结樞蛄小１景l(fā)明可以像制版印刷術(shù)一樣，利用初始基因芯片制造印板，再利用印板大量、快速、低成本制備新基因芯片。

本發(fā)明授權(quán)一種以基因芯片轉(zhuǎn)制印板再大量印制基因芯片的方法在權(quán)利要求書中公布了：1.一種制備基因芯片的方法，其特征在于，以基因芯片轉(zhuǎn)制印板再印制基因芯片，所述方法包括以下步驟： S1獲得初始基因芯片成品及相關(guān)信息，所述信息至少包括：所述初始基因芯片的探針序列及其相關(guān)排列順序、所述初始基因芯片的點(diǎn)陣密度； S2在四塊印板材料上以蝕刻技術(shù)制備微針集群，使得微針集群與初始基因芯片的點(diǎn)陣密度匹配，使得每一個(gè)微針位置對(duì)應(yīng)一個(gè)探針序列； S3對(duì)四塊印板材料的微針尖端分別進(jìn)行表面活化，將表面活化基團(tuán)進(jìn)行化學(xué)修飾保護(hù)，并對(duì)印板材料進(jìn)行表面鈍化處理，消除印板材料對(duì)后繼模板序列合成的影響； S4在四塊印板材料的微針上分別去除化學(xué)修飾保護(hù)基團(tuán)，通過共價(jià)連接方式將一種核苷酸固定在微針上，使得核苷酸通過模板上的連接臂與印板的共價(jià)連接點(diǎn)共價(jià)連接在一起，其中，使得每塊印板材料只連接一種核苷酸，每個(gè)微針尖端的活化基團(tuán)上只連接一個(gè)核苷酸； S5根據(jù)初始基因芯片成品上的探針序列及其相關(guān)排列順序，以初始基因芯片的探針序列的3'末端堿基的互補(bǔ)堿基為基準(zhǔn)，繪制探針序列的3'末端堿基的互補(bǔ)堿基分布圖； S6依據(jù)所述互補(bǔ)堿基分布圖，分別從S4獲得的四塊已共價(jià)連接核苷酸的印板材料上截取相應(yīng)區(qū)塊，并粘貼于印板固定載體上，獲得微針集群， 其中，所述微針集群與初始基因芯片上的探針對(duì)應(yīng)，且每個(gè)微針尖端的堿基與相應(yīng)位置上的探針序列的3'末端堿基互補(bǔ)； S7在初始基因芯片成品上鋪設(shè)DNA聚合酶及所述DNA聚合酶的反應(yīng)體系，將載有所述微針集群的印板固定載體精確安置在基因芯片成品上，使得微針尖端上共價(jià)連接的核苷酸與初始基因芯片成品上探針序列的3'末端堿基互補(bǔ)配對(duì)； S8使所述DNA聚合酶在相關(guān)蛋白的協(xié)助下組裝為DNA復(fù)制起始復(fù)合體，所述DNA復(fù)制起始復(fù)合體包括：噬菌體Φ29的DNA聚合酶、噬菌體Φ29的末端蛋白、噬菌體Φ29的p6單鏈DNA結(jié)合蛋白、四種DNA合成底物dNTP、所述DNA聚合酶合成DNA所需要的其他成分， 所述DNA復(fù)制起始復(fù)合體以初始基因芯片成品的探針序列為指導(dǎo)、以微針尖端的核苷酸起始，按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成模板序列，新合成的模板序列與探針序列完全互補(bǔ)； S9升溫變性，使新合成的模板序列與初始基因芯片成品上探針序列分開，通過液壓加壓使初始基因芯片產(chǎn)品與印板固定載體分離，任選將初始基因芯片產(chǎn)品用于下一輪的印板制備， 將印板固定載體連同在所述印板固定載體上面固定的微針集群、在微針尖端新合成的模板集群轉(zhuǎn)移，進(jìn)行包括清洗工序的后期處理工序，獲得印板。

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