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龍圖騰網(wǎng)獲悉李太生申請的專利一種肺癌晚期免疫表征的流式細(xì)胞儀檢測試劑盒及其檢測方法獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號為：CN114720356B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-05-13發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為：202210268118.7，技術(shù)領(lǐng)域涉及：G01N15/14；該發(fā)明授權(quán)一種肺癌晚期免疫表征的流式細(xì)胞儀檢測試劑盒及其檢測方法是由李太生;羅玲;劉曉笙設(shè)計研發(fā)完成，并于2022-03-18向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。

本一種肺癌晚期免疫表征的流式細(xì)胞儀檢測試劑盒及其檢測方法在說明書摘要公布了：本發(fā)明一種肺癌晚期免疫表征的流式細(xì)胞儀檢測試劑盒，試劑A包括由不同顏色染料染色的熒光微球標(biāo)記的CD45單克隆抗體、CD3單克隆抗體、CD4單克隆抗體、CD8單克隆抗體以及PD?1單克隆抗體，本發(fā)明試劑盒以針對晚期肺癌患者接受免疫檢查點抑制劑后的外周血作為樣本進(jìn)行檢測，利用試劑盒檢測待測樣本中CD8+PD?1+CD8+T細(xì)胞％、CD4+PD?1+CD4+T細(xì)胞％、CD8+HLA?DR+CD8+T細(xì)胞％，各指標(biāo)可以綜合表征患者的免疫水平。

本發(fā)明授權(quán)一種肺癌晚期免疫表征的流式細(xì)胞儀檢測試劑盒及其檢測方法在權(quán)利要求書中公布了：1.一種肺癌晚期免疫表征的流式細(xì)胞儀檢測試劑盒的檢測方法，所述方法為非診斷目的的方法，其特征在于，包括以下步驟：步驟一、使用反向移液技術(shù)分別吸取EDTA-K2抗凝全血至流式管底，避免血液碰到管壁上部；步驟二、向管內(nèi)加入試劑A，試劑A與全血體積比為1:10，渦旋儀混勻；室溫避光孵育；向管內(nèi)加入試劑B，試劑B與全血體積比為20:1；渦旋儀混勻；避光反應(yīng)；試劑A包括由不同顏色染料染色的熒光微球標(biāo)記的CD45單克隆抗體、CD3單克隆抗體、CD4單克隆抗體、CD8單克隆抗體、PD-1單克隆抗體、HLA-DR單克隆抗體，各抗體濃度比例為1：1：1：1：1：1，均為0.05-1mgmL；試劑B為紅細(xì)胞裂解液；步驟三、渦旋儀混勻后，4℃離心棄上清液，加入PBS溶液清洗，渦旋混勻后4℃離心，棄上清液，再次加入PBS溶液形成細(xì)胞懸液，使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測；步驟四、篩選CD45抗體陽性且SSC值為0-50K范圍內(nèi)的細(xì)胞，確定為淋巴細(xì)胞；從淋巴細(xì)胞中篩選CD3抗體陽性的細(xì)胞，確定為T細(xì)胞；從T細(xì)胞中篩選CD4抗體陽性的細(xì)胞，從CD4抗體陽性的細(xì)胞中篩選PD-1抗體陽性的細(xì)胞，計算CD4+PD-1+CD4+T細(xì)胞的百分比，從T細(xì)胞中篩選CD8抗體陽性的細(xì)胞，從CD8抗體陽性的細(xì)胞中篩選PD-1抗體陽性的細(xì)胞，計算CD8+PD-1+CD8+T細(xì)胞的百分比，從CD8抗體陽性的細(xì)胞中篩選HLA-DR抗體陽性的細(xì)胞，計算CD8+HLA-DR+CD8+T細(xì)胞的百分比。

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